Qualitätskontrolle
HPLC und Massenspektrometrie erklärt
Die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) ist der Goldstandard für die Peptidreinheitsanalyse. Die Verbindung wird gelöst, unter hohem Druck durch eine Säule geleitet und anhand ihrer chemischen Eigenschaften getrennt. Jede Komponente erzeugt einen eindeutigen Peak; die Fläche unter dem Zielpeak, geteilt durch die Gesamtpeakfläche, ergibt den Reinheitsprozentsatz.
Die Massenspektrometrie bestätigt, dass das von uns hergestellte Molekül das Molekül ist, das wir herstellen wollten. Die Verbindung wird ionisiert, beschleunigt und nach dem Masse-zu-Ladung-Verhältnis gemessen. Die Ausgabe muss mit dem theoretischen Molekulargewicht der Zielsequenz übereinstimmen – andernfalls wird das Peptid abgelehnt.
Zusammen beantworten HPLC und MS die beiden entscheidenden Fragen: Ist es die richtige Verbindung und ist sie rein?