Contrôle qualité
HPLC et spectrométrie de masse, expliquées
La chromatographie liquide haute performance (CLHP) est la référence en matière d'analyse de la pureté des peptides. Le composé est dissous, passe à travers une colonne sous haute pression et est séparé en fonction de ses propriétés chimiques. Chaque composant produit un pic distinct ; l'aire sous le pic cible, divisée par l'aire totale des pics, donne le pourcentage de pureté.
La spectrométrie de masse confirme que la molécule que nous avons fabriquée est la molécule que nous avions l'intention de fabriquer. Le composé est ionisé, accéléré et mesuré par rapport masse/charge. Le résultat doit correspondre au poids moléculaire théorique de la séquence cible, sinon le peptide est rejeté.
Ensemble, la CLHP et la SM répondent aux deux questions importantes : s'agit-il du bon composé et est-il pur ?